产品说明: β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关 键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造 纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。 β-木糖苷酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm 处有特征吸收峰, 测定405nm 光吸收增加速率,可计算β-木糖苷酶活性。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。 操作步骤: 一、粗酶液提取 1. 植物样本:称取约0.1g 样品,加1.0 mL 提取液充分冰浴匀浆,然后12000rpm,4℃,离心20min, 弃沉淀,取20μL 上清测定蛋白含量,剩余上清作为待测酶液。 2. 细菌、真菌样本:收集约500 万个细胞,加入1.0 mL 提取液,超声波破碎(冰浴,功率300w, 超声3 秒,间隔7 秒,总时间3min);然后10000rpm,4℃,离心10min,弃沉淀,取20μL 上 清测定蛋白含量,剩余上清置于冰上待测。 3. 标准液的处理:用试剂二将标准液稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0 mol/ml。 注意事项: 1、吸光度变化应该控制在0.05-0.6 之间。否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算 的稀释倍数要相应改变。 2、样品蛋白质含量需要另外测定,可选用考马斯亮蓝法蛋白含量测定试剂盒进行测定。 |