碘[125I]睾酮

放射免疫分析药盒说明书

碘[125I]睾酮放射免疫分析药盒说明书

【药品名称】

通用名：碘[125I]睾酮放射免疫分析药盒

英文名：Iodine[125I] Testosterone Radioimmunoassay Kit

汉语拼音：Dian [125I] Gaotong Fangshemianyifenxi Yaohe

【成分】

【性状】液体组分(免疫分离剂除外)应澄清，无沉淀或絮状物；冻干组分应呈疏松状，复溶后应无沉淀或絮状物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素为碘[125I]，其物理半衰期(T1/2)为60天。

【意义】

睾酮（testosterone, T）是一种19碳甾体激素，分子量288D，男性主要由睾丸间隙细胞分泌，少量来自肾上腺皮质；女性主要由肾上腺网状带分泌。睾酮是雄性激素中活性zui强的一种激素，其主要生理作用系维持男性第二性征和正常性腺功能，维持女性性欲以及促进蛋白质合成代谢等。

本药盒主要用于血清中睾酮含量的测定，对男性性早熟、男性性功能低下、阳萎、睾丸发育不全、睾丸细胞瘤、女性特发性多毛症以及Cushing氏综合征等内分泌疾病的诊断均有重要意义。

血清T增高常见于：睾丸良性间质细胞瘤、先天性肾上腺皮质增生症、真性性早熟症、皮质醇增多症、女性男性化肿瘤、女性特发性多毛症、多囊卵巢综合症、注射睾酮或促性腺激素、肥胖以及中晚期孕妇等。

血清T降低常见于：男性性功能低下、原发性睾丸发育不全性幼稚、垂体功能减退、系统性红斑狼疮（阳性率约50%）、阳萎、骨质疏松症、垂体性矮小症、甲状腺功能减低、高PRL血症、部分男性乳房发育、外伤后性功能减退、隐睾炎等。

【测定原理】

本药盒采用竞争放射免疫分析法，即标准或待测样品中的T和125I-T共同与*的特异性睾酮抗体在适宜的条件下进行竞争性结合反应。一部分125I-T与抗体结合形成复合物，而另一部分呈游离状态。125I-T与抗体结合的比例取决于标准或待测样品中非标记T的含量，非标记T的含量越高，125I-T与抗体形成复合物越少；非标记T的含量越低，125I-T与抗体形成复合物越多。抗原-抗体复合物用免疫分离剂沉淀下来，测定沉淀物的放射性计数。经过适当的数据处理后可获得标准曲线，从标准曲线上查出被测样品的睾酮含量（数据可由计算机自动处理）。

【适用仪器】适用于各类ν-放射免疫分析仪。

【样本要求】

取静脉血分离血清，待测；如不立即测量，可将样品密封后，置于2~8℃或-20℃储存备测，2~8℃保存不应超过1周，-20℃保存不超过2个月。冰冻样品在保存过程中应避免反复冻融。冰冻样品测定前，将样品置于室温或常温水中融化，并充分摇匀!

【用法用量】

1 试剂配制、使用方法和保存

.1 T标准品：淡黄色液体，直接使用。浓度依次为：0、0.1、0.5、2、8、20ng/ml，2~8℃保存42天内稳定；-20℃冷冻保存，标识的有效期内稳定，应避免反复冻融。

• 125I-T：红色液体，直接使用。含1~3μCi  125I标记的19位睾酮衍生物，2~8℃保存，标识的有效期内稳定。
• 兔抗-T抗体：蓝色液体，直接使用。2~8℃保存，标识的有效期内稳定；开封后42天稳定。
• 驴抗兔免疫分离剂：液体，加样前充分摇匀。2~8℃保存标识的有效期内稳定。开封后45天内稳定。
• T质控血清：淡黄色液体，直接使用。2~8℃保存42天内稳定，―20℃冷冻保存标识的有效期内稳定，应避免反复冻融。附值见质控血清使用说明书。

2测定步骤

取圆底聚苯乙烯试管若干，用记号笔或特殊铅笔编号NSB、S0-S5和待测样品管等，然后用微量加样器按下表加样。加样前所有试剂（尤其分离剂！）包括待测样品要摇匀，并且平衡到室温。

加样顺序表：                            单位：μl

3数据处理

• 联机处理: 由电脑自动处理得出结果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，处理软件也不一样，用户一定要使用适合的处理软件进行数据处理。在此建议用户使用log-logit或四参数数据处理模式。
• 手工作图或计算器处理:
  •  百分结合率计算：设S0管计数为B0，各标准管或样品管计数为B，非特异管计数为NSB，则百分结合率计算公式为B/ B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×

3.2.2 logit计算：各标准点或样品管的logit值计算公式为logit=ln[(B/ B0)/(1－B/ B0)]

3.2.3 手工作图：以标准浓度取log值为横坐标，对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标，对应的B/B0为纵坐标在log-logit坐标纸上画出标准曲线（理想化时是一条直线）。根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意：如果使用普通坐标纸，查出的数值应取反对数才是zui后的浓度值。

3.2.4计算器处理：使用有线性拟合功能的计算器，可以比较方便地计算出样品浓度值，具体操作方法请查阅计算器的使用说明书。

3.3 尿液中睾酮的测定方法及数据处理

3.3.1收集24小时尿，量总体积，混匀后取尿液0.2ml，加 0.25N盐酸0.8ml，于30℃水浴水解20~24小时，以此水解尿作为测定样品。

3.3.2取水解尿样品25μl，加到样品管中，用缓冲液（此缓冲液为睾酮水解尿）补到50ul即加25ul测尿缓冲液。该缓冲液为0.24M Triss溶液，其作用是将强酸性的水解尿样品调整为接近中性，否则会使测定值严重失真（偏高）！，

3.3.3 24小时睾酮尿含量的计算：

尿液浓度= A·V1/V2·50/V3 ng/ml=10A ng/ml

24小时尿中睾酮总量=A·V1/V2·50/V3·Dng=0.01A·Dμg

其中： A—从标准曲线上查得睾酮的浓度（ng/ml）

V1——水解尿的总体积（1ml）

V2——被水解的尿体积（0.2ml）

V3——水解尿加入的体积（25μl）

50为加入测量管中水解尿与缓冲液的总体积

D—24小时总尿量（ml）

    例如：某正常人24小时总尿量为2000ml，在标准曲线上查出浓度为3.8ng/ml，则：

尿液浓度=10×3.8ng/ml=38ng/ml。

24小时尿中睾酮总量=0.01×3.8×2000μg =78μg。

3.4 标准曲线举例（仅供参考，不得用于实际计算）。浓度单位ng/ml

【参考正常值】

下列所提供的数据仅供参考，每个实验室都应根据本实验室的条件及接触的人群建立自己实验室睾酮的正常值范围。

1．人血清睾酮参考正常值：                  （单位：ng/ml）

• 尿液中睾酮参考正常值：

      成年男性：47~117μg/24小时尿；

      成年女性：0.5~12μg/24小时尿。

• 唾液中睾酮参考正常值：　

成年男性：0.15~0.25ng/ml；

成年女性：卵泡期0.08~0.13ng/ml，排卵期0.24~32ng/ml，黄体期0.11~0.15ng/ml。

单位换算：1 ng/ml =100ng/dl=1000ng/l=1μg/l=3.46nmol/l

由于地区及使用仪器不同，所测的正常值会存在一定的差异，所以本说明书提供的正常值仅作参考。各实验室能建立符合本实验室要求的正常值范围。

【产品性能指标】

• 测定范围：0.1~20ng/ml；
• 灵敏度：0.02ng/ml；
• 精密度：批内变异CV<10%；批间变异CV<15%。
• 特异性：19位睾酮抗体与下列睾酮类似物的交叉反应率如下：

       双氢睾酮     1.1×10-2%        雌二醇     2.1×10-2%

     雌 三 醇     2×10-15%         孕  酮     3.2×10-2%

     雄烯二酮     1.2×10-5%

5．使用期限：见产品外包装。

【禁忌】本品仅供体外诊断用! 
【注意事项】

• 收到试剂盒后，尽快存放在2~8℃。
• 使用前请详细阅读此说明书。
• 当样品中睾酮浓度高于20ng/ml时，可将样品用“0”标准或较低含量的女性血清稀释5~10倍后复测，测定浓度乘以稀释倍数即为样品浓度。
• 不同药盒或不同月份的同种药盒的组分不得混用。
• 吸弃上清液时，注意不得损失沉淀物，否则将明显影响测定结果。
• 药盒请在有效期内使用。
• 标本均应视为有潜在传染性，请按传染病实验室规程操作。
• 使用本药盒应注意放射防护，放射性废弃物须按放射防护条例规定处理。
• 使用本品的操作人员应经过专业技术培训。

【孕妇及哺乳期妇女用药】由于本品仅供体外诊断用，孕妇及哺乳期妇女不需接触本品，所以对其健康无损害。
【儿童用药】由于本品仅供体外诊断用，儿童不需接触本品，所以对其健康无损害。

【贮藏】2～8℃保存。

【有效期】1个月。

【执行标准】国家食品药品监督管理局《国家药品标准》，国家药典委员会  编 2005年5月，WS1-(R-41)-2004Z。