细胞粘附剂

细胞粘附剂：适用于各种原代细胞如乳鼠脑神经元、易漂浮的传代细胞如 PC12 和 HEK293 细胞，也适用于 药物处理易漂浮细胞；其不仅能够明显改善细胞生长状态、增加细胞数量，还可以使细胞容易耐受 洗涤、换液、药物处理造成的脱落。对于生长在处理过的瓶皿中的细胞而言，使用细胞贴壁粘附剂 可使细胞的转染效率显著增加 2-5 倍。 

使用： 

1. 使用时，将此浓缩溶液以 1:200-1:500 比例稀释于灭菌纯水或生理盐水（0.9% NaCl）或 PBS 缓冲液中，制备成工作溶液。注意：不同细胞对粘附剂的敏感度不同，通常粘附剂处理后的器 皿培养细胞形态及生长状态均应正常，如果细胞比较敏感，选用高浓度的细胞贴壁粘附剂会使 细胞过度粘着，有可能出现细胞褶皱、伪足伸出不畅或细胞移动分散不佳等现象，此时应将其 进行高比例稀释，避免出现以上情况。 

2. 加入新鲜工作液使其*覆盖培养瓶皿表面。室温或 37 ºC 孵育 30 min，偶尔摇动。 

3. *弃去瓶皿中的液体。可用灭菌蒸馏水或灭菌生理盐水或 PBS 缓冲液等洗涤瓶皿一次，但 也可不洗涤而尽量甩干后直接铺种细胞。经过处理的瓶皿可存放数天后使用。 

4. 甩干瓶皿即可用于铺种细胞，增加多种原代培养细胞如神经元细胞的贴壁能力。 

可大致分为五类:钙粘素、选择素、免疫球蛋白超家族、整合素及透明质酸粘素。

一、钙粘素

钙粘素(cadherin)属亲同性CAM,其作用依赖于Ca2+。至今已鉴定出30种以上钙粘素,分布于不同的组织。

钙粘素分子结构同源性很高,其胞外部分形成5个结构域,其中4个同源,均含Ca2+结合部位。决定钙粘素结合特异性的部位在靠N末端的一个结构域中,只要变更其中2个氨基酸残基即可使结合特异性由E-钙粘素转变为P-钙粘素。钙粘素分子的胞质部分是最高度保守的区域,参与信号转导。

钙粘素通过不同的连接蛋白质与不同的细胞骨架成分相连,如E-钙粘素通过α-、β-、γ-连锁蛋白(catenin)以及粘着斑蛋白(vinculin)、锚蛋白、α辅肌动蛋白等与肌动蛋白纤维相连;桥粒中的desmoglein及desmocollin则通过桥粒致密斑与中间纤维相连。

钙粘素的作用主要有以下几个方面:

1.介导细胞连接,在成年脊椎动物,E-钙粘素是保持上皮细胞相互粘合的主要CAM,是粘合带的主要构成成分。桥粒中的钙粘素就是desmoglein 及desmocollin。

2.参与细胞分化,钙粘素对于胚胎细胞的早期分化及成体组织(尤其是上皮及神经组织)的构筑有重要作用。在发育过程中通过调控钙粘素表达的种类与数量可决定胚胎细胞间的相互作用(粘合、分离、迁移、再粘合),从而通过细胞的微环境,影响细胞的分化,参与器官形成过程。抑制细胞迁移,很多种癌组织中细胞表面的E钙粘素减少或消失,以致癌细胞易从瘤块脱落,成为侵袭与转移的前提。因而有人将E钙粘素视为转移抑制分子。

细胞粘附剂